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1.準備好所有試驗額定所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等；
 

2.依據(jù)檢測標本數(shù)量確認所需試劑的量；

 

3.按闡明書將所用試劑平衡至室溫，制造所需試劑；

 

4.標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法試驗者，留意低溫保存。

試驗中為了確認信號和背景應將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預試驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書慣例供給的范圍進行操作。

規(guī)范品的制造：對于每種細胞因子應仔細閱讀闡明書，留意每批的細節(jié)。在運用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地回收其間的細胞因子。依據(jù)每批闡明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復溶。

為了優(yōu)化靈敏度，主張過夜孵育規(guī)范品和標本。若運用過氧化物酶作為顯色體系，應禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時，如血清，主張在標本稀釋液中加不相干的Ig。

常見問題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍；
2、加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理；
3、洗板時容易造成誤差： 因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動；
4、顯色問題： 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈；
7、嚴格按照說明書操作。